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真菌毒素的膠體金快速檢測:原理與操作規(guī)范

更新時間:2026-01-14   點擊次數(shù):301次
真菌毒素是真菌在生長繁殖過程中產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物,部分種類(如 嘔吐毒素)可引發(fā)人體急性或慢性中毒,嚴(yán)重威脅食品安全。膠體金免疫層析法憑借快速、簡便、無需專業(yè)設(shè)備的優(yōu)勢,可在 30 分鐘內(nèi)完成真菌毒素初篩,是現(xiàn)場監(jiān)測與基層食安篩查的理想方法。

一、適用范圍

本方法適用于糧食、油料、飼料及各類加工食品中嘔吐毒素等真菌毒素的快速定性篩查,檢測結(jié)果可作為是否需要進(jìn)一步實驗室定量檢測的依據(jù)。

二、檢測原理

試紙卡基于競爭法膠體金免疫層析技術(shù)設(shè)計,核心反應(yīng)過程如下:
  1. 將處理后的樣品檢測液滴入試紙卡樣品孔,液體會沿層析膜向檢測區(qū)擴(kuò)散;

  2. 檢測液中的真菌毒素會與金標(biāo)墊上的金標(biāo)抗體特異性結(jié)合,形成 “毒素 - 金標(biāo)抗體" 復(fù)合物;

  3. 陽性結(jié)果:若檢測液中毒素濃度高于檢出限,金標(biāo)抗體將全部與毒素結(jié)合,無法在檢測線(T 線)處與包被抗原結(jié)合,試紙僅出現(xiàn)質(zhì)控線(C 線),無可見 T 線;

  4. 陰性結(jié)果:若檢測液中毒素濃度低于檢出限,部分金標(biāo)抗體未與毒素結(jié)合,會在 T 線處與包被抗原結(jié)合,形成可見的紅色 T 線,同時 C 線正常顯色(C 線顯色證明試紙有效)。

核心檢出限

  • 嘔吐毒素:≤100ng/mL

三、簡易操作步驟

  1. 樣品處理:固體樣品(如糧食)取 2~5g 研磨均勻,按試劑盒要求加入提取液,振蕩 5~10 分鐘后靜置,取上清液作為檢測液;液體樣品可直接取上清或按比例稀釋后檢測。

  2. 加樣檢測:將試紙卡平放,用滴管吸取檢測液,緩慢滴加 3~5 滴至樣品孔中。

  3. 結(jié)果觀察:室溫下靜置 10~15 分鐘(最長不超過 30 分鐘),在白色背景下觀察試紙條顯色情況,超過 30 分鐘的結(jié)果無效。

四、結(jié)果判定與注意事項

(一)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

試紙顯色情況結(jié)果判定說明
C 線顯色,T 線不顯色陽性樣品中毒素濃度≥檢出限,需送實驗室定量檢測
C 線顯色,T 線顯色陰性樣品中毒素濃度<檢出限
C 線不顯色(無論 T 線是否顯色)無效試紙失效或操作不當(dāng),需重新檢測

(二)關(guān)鍵注意事項

  1. 試紙卡需密封儲存于2~30℃陰涼干燥處,避免陽光直射、高溫高濕環(huán)境,使用前核對保質(zhì)期。

  2. 樣品處理需充分,固體樣品研磨要均勻,提取振蕩時間需達(dá)標(biāo),否則會導(dǎo)致毒素提取不充分,出現(xiàn)假陰性。

  3. 檢測液需澄清無雜質(zhì),若有渾濁需過濾后再使用,防止堵塞層析膜影響結(jié)果。

  4. 膠體金檢測僅為定性初篩,陽性樣品需送實驗室采用高效液相色譜法等國標(biāo)方法進(jìn)行精準(zhǔn)定量


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